"Super Tube Cells|狗腎細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
CL MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
Super Tube Cells|狗腎細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
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細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
WM266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
Super Tube Cells|狗腎細胞系
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
HEK-293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
U-266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
Ca761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
HEK293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
4T1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
NIH3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
MCF/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
Super Tube Cells|狗腎細胞系
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、BALL1細胞、L cell line細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細胞、MCF7/WT細胞、COLO679細胞
MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細胞、786-O RCC細胞、Ca9-22細胞
IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細胞、201T細胞、EAhy 926細胞
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