"V79 Cells|倉(cāng)鼠肺細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肺;自發(fā)永生;雄性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
Y3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞
TCam-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細(xì)胞、NB-9細(xì)胞、HFF細(xì)胞
MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn):無菌意識(shí)要強(qiáng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置,其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時(shí),我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計(jì)時(shí),一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多,且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
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細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞
ARO81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS2細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
JB6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞
H-3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
H-1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動(dòng)了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動(dòng)或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不均勻。研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C 太久。一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個(gè)是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時(shí)間等方法來調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞
Lung cancer-1/squamous細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞
SW-1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ521細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞、C42細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞
GLC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞、TE-8細(xì)胞
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NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞
UWB1-289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細(xì)胞、HHFK細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞
IHH-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞
VP 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞
GTL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細(xì)胞、H-1341細(xì)胞、MBVP細(xì)胞
KPL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT1-1細(xì)胞、WML2細(xì)胞、ABC1細(xì)胞
MGHU3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT.4細(xì)胞、WM-115細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
U2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞
MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞
NCI-H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細(xì)胞、PT67細(xì)胞、H2108細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細(xì)胞、NB4細(xì)胞、TE 671細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞
ECV304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞
JB6 Cl 30-7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
Chinese Hamster Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞
Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞
HCC1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞
D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞
BaF3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV304細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞、H-1437細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
MOLT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
V79 Cells|倉(cāng)鼠肺細(xì)胞系
P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細(xì)胞、H2171細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞
LN 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞
NCIH660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、D407細(xì)胞
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