"SK-N-SH Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:SK-N-SH細胞系由J.L.Bieder建系,它與SK-N-MC所不同的是倍增時間較長且多巴胺-β-羥基酶水平較高。 SK-N-SH在細胞介導的細胞毒性試驗中用作靶細胞系。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SK-N-SH Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我常看到一個比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
SUDHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
細胞生長特性:懸浮生長
SK-N-SH Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
LY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
SP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
BEP2D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
SK-N-SH Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
COLO394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞
D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
NCIH146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
IMR32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
Cor L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
TMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞
BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H508細胞、H522細胞、C918細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
KPL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
SK-N-SH Adherent人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
T9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801D細胞、CWR22-R1細胞、NCIH250細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細胞、FUOV1細胞、HB611細胞
LY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細胞、Clone Y-1細胞、MeT 5A細胞
"