"KB Adherent口腔表皮樣癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：最初認(rèn)為這個(gè)細(xì)胞源自口腔表皮癌，但隨后通過同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn)，起源細(xì)胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 有報(bào)告稱KB細(xì)胞含有人乳頭狀瘤病毒１８ (HPV-１８)序列。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KB Adherent口腔表皮樣癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-81細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞
NCI-H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞、Scott細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
KB Adherent口腔表皮樣癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運(yùn)動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
Dunn LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞
MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞
IMR 90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-398細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
KYSE-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE1細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞、BTT739細(xì)胞
KB Adherent口腔表皮樣癌細(xì)胞系
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
MCF10-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、SNU251細(xì)胞
Vero E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
PL 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞
MG63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1271細(xì)胞、VP 229細(xì)胞、SW 13細(xì)胞
138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9724細(xì)胞、A-204細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞
NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞
COLO 680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細(xì)胞、J45.01細(xì)胞、5637細(xì)胞
U 266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-4細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞
SNU-484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
H-1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞
UPCI-SCC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
SJRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEL細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
GC-2spd(ts)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
McCoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞、CA-46細(xì)胞
QGP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞
CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞
SK MES 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.3細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞
TK-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 03.27細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、Hep2細(xì)胞
J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
KB Adherent口腔表皮樣癌細(xì)胞系
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
SF-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSMC細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞、Ly8細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
NIT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞
S.B.細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7402細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞、DU 145細(xì)胞
H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞
MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞、RCC4細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、H-889細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細(xì)胞、HLFa細(xì)胞、SC細(xì)胞
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞
"