"MIO-M1 Cells|視網(wǎng)膜Muller干細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞；自發(fā)永生；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
N1E115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：①進(jìn)無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點(diǎn)是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉，熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
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細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
Hs706T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR786細(xì)胞、JC細(xì)胞、Panc02細(xì)胞
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞
R D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：細(xì)胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細(xì)胞懸液中；不同細(xì)胞消化時(shí)間有差異，以實(shí)際鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)，大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化，消化時(shí)間不宜過長；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期時(shí)進(jìn)行凍存操作，確保細(xì)胞凍存時(shí)狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細(xì)胞特性進(jìn)行調(diào)整；凍存細(xì)胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細(xì)胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準(zhǔn)備凍存的細(xì)胞；顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細(xì)胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細(xì)胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備事項(xiàng)：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動(dòng)移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細(xì)胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長特性：貼壁
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞
B-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-86-86細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞、H1975細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時(shí)，易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細(xì)胞傳代時(shí)建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化，對(duì)于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化，細(xì)胞密度過高超過80%時(shí)，采用分步消化法。胰酶儲(chǔ)存在-20°C，解凍在4°C進(jìn)行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機(jī)會(huì)。胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個(gè)關(guān)鍵步驟：消化過度細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，細(xì)胞會(huì)成片脫落，嚴(yán)重影響細(xì)胞活性，并有部分細(xì)胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會(huì)損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對(duì)消化液的敏感性不同，胰酶消化的時(shí)間也會(huì)有差異。胰酶消化時(shí)間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲(chǔ)存時(shí)間，胰酶的儲(chǔ)存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。對(duì)于新購買的細(xì)胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時(shí)間，可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓，記錄消化時(shí)間，下一次操作參考之前的記錄來控制時(shí)間即可。
Metastatic Variant-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞
A-1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-29細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
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H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
EAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
HRIF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
AQ-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149PT細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞
QGP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
COLO-320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細(xì)胞、G-401細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞
A2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞
U2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞
CEM-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞
RL-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、MDA468細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
DH 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細(xì)胞、MEG01細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞
FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞
CFPAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞
GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
HBL100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB985細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞
SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞
H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞
SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞
RGM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC_7860細(xì)胞、MDA436細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
NCI-H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞
McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
U-87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFHL-2細(xì)胞、A375細(xì)胞、T98 G細(xì)胞
NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞
G 292 Clone A 141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HEECs細(xì)胞、COV504細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
MIO-M1 Cells|視網(wǎng)膜Muller干細(xì)胞系
SNUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、L615細(xì)胞
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞
JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞
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