"NCI-H295R Cells|人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞系
細胞背景資料:腎上腺皮質(zhì)癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
NCI-H295R Cells|人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
RMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
WM239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H295R Cells|人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞,在凍存前24h換液;按照常規(guī)方法消化,離心,收集細胞沉淀;用血清重懸細胞沉淀,用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù);配制細胞凍存液,將凍存液加到細胞液中,吹打混勻,控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml;將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記好的凍存管中,旋緊管蓋;將凍存管放入程序凍存盒中,凍存盒立即移至-80°C冰箱中,過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳,會嚴重影響復(fù)蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存,凍存前一天細胞進行換液;消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復(fù)蘇的活率;凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作,會嚴重影響細胞活率。
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
Ect1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞
NCI-H295R Cells|人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞系
Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
HCC1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
OVCAR.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
RCC-JF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
NCI-H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞
AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
HDSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
Pa17C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
KYSE-150細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
HS0578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
SJSA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
HOS-143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
SKNAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
TOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
NCI-H295R Cells|人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞系
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT483細胞、U118細胞、CBRH7919細胞
COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、CEM clone 7細胞、NB19-RIKEN細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6-Swiss albino細胞、HTR-8/SVneo細胞、AHH-1細胞
NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細胞、COV362細胞、ID8細胞
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