"J774A1 Lymphoblastoid cells小鼠單核巨噬細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
CHP212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞
OVCAR.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞
HCC1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
細胞生長:懸浮
J774A1 Lymphoblastoid cells小鼠單核巨噬細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
U031細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL299細胞、NCIH1385細胞、CCF-STTG1細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
MFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
J774A1 Lymphoblastoid cells小鼠單核巨噬細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
NCTC 3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
J774A1 Lymphoblastoid cells小鼠單核巨噬細胞系
OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
H4IIE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
SW 962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
MDA-MB-134 VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
NCI-H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
TCC-PAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞
SCC25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
HOS(TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
Nb 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
MDA-MB 468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
526mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
J774A1 Lymphoblastoid cells小鼠單核巨噬細胞系
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細胞、A375-MEL細胞、H-1836細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2C12細胞、COLO 16細胞、MCF7-CTRL細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、3D4/21細胞、KYSE 270細胞
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