"WIL2 S Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
OVCAR433細胞系相關產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
RPMC細胞系相關產(chǎn)品:RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞
H-2009細胞系相關產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
細胞生長:懸浮
WIL2 S Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品:EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
A375-S2細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
CCD 19Lu細胞系相關產(chǎn)品:TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
SU-DHL2細胞系相關產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
ECC1細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WIL2 S Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
NCI-H28細胞系相關產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
A375mel細胞系相關產(chǎn)品:SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
MCF-7/ADR細胞系相關產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
MAC1細胞系相關產(chǎn)品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
6T-CEM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
M-G63細胞系相關產(chǎn)品:SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
GP293細胞系相關產(chǎn)品:KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
HBZY 1細胞系相關產(chǎn)品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
Hep-G2細胞系相關產(chǎn)品:Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
WIL2 S Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
CCFSTTG1細胞系相關產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
NCIH1792細胞系相關產(chǎn)品:HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
BMF細胞系相關產(chǎn)品:TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
NCIH2023細胞系相關產(chǎn)品:CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
DHL4細胞系相關產(chǎn)品:IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
PL-12細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
PL-12細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
Ra #1細胞系相關產(chǎn)品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
PCI-SG231細胞系相關產(chǎn)品:HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞
R 2 C細胞系相關產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
SF-539 BT細胞系相關產(chǎn)品:SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
LS180細胞系相關產(chǎn)品:SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
U-373MG細胞系相關產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關產(chǎn)品:Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞
H2452細胞系相關產(chǎn)品:BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
CT26細胞系相關產(chǎn)品:H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
NW38細胞系相關產(chǎn)品:H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
VCaP細胞系相關產(chǎn)品:Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
HCO細胞系相關產(chǎn)品:SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
Panc05.04細胞系相關產(chǎn)品:HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
RCC10RGB細胞系相關產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
SUP-M2細胞系相關產(chǎn)品:SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
WM-266-mel細胞系相關產(chǎn)品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
AtT-20細胞系相關產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
SW-954細胞系相關產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
COLO 201細胞系相關產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
AML-EOL-1細胞系相關產(chǎn)品:HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
Det 562細胞系相關產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
ZR751細胞系相關產(chǎn)品:PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
TCCPAN2細胞系相關產(chǎn)品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
SK-RC-42細胞系相關產(chǎn)品:LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關產(chǎn)品:451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
mIMCD3細胞系相關產(chǎn)品:BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
HL 60細胞系相關產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
P3/X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞
639 V細胞系相關產(chǎn)品:CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
Dx5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
TCC-SUP細胞系相關產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
GM05372E細胞系相關產(chǎn)品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
CTLL2細胞系相關產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
Vero 76細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
RERF-LC-MS細胞系相關產(chǎn)品:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
RPMI8226細胞系相關產(chǎn)品:TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
NOZC-1細胞系相關產(chǎn)品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
OV-CA 432細胞系相關產(chǎn)品:KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
Molm 14細胞系相關產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
L-6 myoblast細胞系相關產(chǎn)品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
NL20SV細胞系相關產(chǎn)品:MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關產(chǎn)品:H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
WIL2 S Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
BCaP 37細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
CLL-CII細胞系相關產(chǎn)品:SW13細胞、MSC細胞、ChaGo-K-1細胞
NCI-H2009細胞系相關產(chǎn)品:CHP 212細胞、A375-SM細胞、SK-MEL-28細胞
MCF-7/ADR細胞系相關產(chǎn)品:CAL 62細胞、TE-32細胞、NCI-SNU-601細胞
"