"Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
細胞生長:懸浮
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
Hs683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
253J-BV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
COLO-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
SCC 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
TSUpr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞系
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
Granta-519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞
PLA801-95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞
CNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞
CV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
OCI/AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
MRC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
PTK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
ANA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
KG-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
HS-294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞
CAL27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
RKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
DHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞系
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hs 934.T細胞、HuT 78細胞
NCIH1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 480細胞、HUT-28細胞、EFM192B細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細胞、H-820細胞、YD38細胞
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