"38C13 Lymphoblastoid cells小鼠B淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:B淋巴瘤;C3H/eB
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
細胞生長:懸浮
38C13 Lymphoblastoid cells小鼠B淋巴瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
38C13 Lymphoblastoid cells小鼠B淋巴瘤細胞系
細胞生長特性:半貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
T9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801D細胞、CWR22-R1細胞、NCIH250細胞
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H766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞
52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
D324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
NCI-H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
Hs819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
NCIH460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
UCLA-SO-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞
EA. hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
GM02219D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞
NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
38C13 Lymphoblastoid cells小鼠B淋巴瘤細胞系
G-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞
Kelly細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細胞、MDA-MB 453細胞、RBSMC細胞
KE37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H1623細胞
HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細胞、CG-4細胞、AM-38細胞
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