"OCI-AML-2 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞背景資料:急性髓系白血病;男性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
KNS81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
細胞生長:懸浮
OCI-AML-2 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
MOVAS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OCI-AML-2 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
C4-2 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
OCI-AML-2 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
HCCC-9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
CCRF CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
OCI/AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
SNU739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
NF639細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
MDCK II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
Colon-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞
SLMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
TGW-nu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞
Reuber H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞
MDCC MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
NCI-H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
CHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
OCI-AML-2 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
AR42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細胞、AR41P細胞、GP293細胞
Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52PE細胞、U266-B1細胞、MEF細胞
M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細胞、MMQ細胞、ML2細胞
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