"WEHI-3B Lymphoblastoid cells小鼠髓樣單核白血病細胞系
細胞背景資料：白血??；BALB/c
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
HFLS細胞系相關產品：MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
BHP-10細胞系相關產品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
8226細胞系相關產品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
細胞生長：懸浮
WEHI-3B Lymphoblastoid cells小鼠髓樣單核白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用，近年來細胞學蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進展，細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜，需要的實驗設備種類繁多，下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實際上普通蒸餾水經玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡，血清中內毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高，會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在１００級空氣質量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉放-２０℃ １ hour，再轉入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉移到液氮內(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材：細胞實驗中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HEK293細胞系相關產品：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞
H1437細胞系相關產品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
LU-65M細胞系相關產品：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
NCIH522細胞系相關產品：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
SCC-7細胞系相關產品：NCIH2052細胞、COLO 320 DM細胞、SNG-M細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WEHI-3B Lymphoblastoid cells小鼠髓樣單核白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
FRTL5細胞系相關產品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
HCC-95細胞系相關產品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
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U-266 AR1細胞系相關產品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
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TW01細胞系相關產品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
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NALM6細胞系相關產品：Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關產品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
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Ly7細胞系相關產品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
HFL-1細胞系相關產品：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞
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HT144細胞系相關產品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
Colon 26細胞系相關產品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
RBMVEC細胞系相關產品：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞
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H35 Reuber細胞系相關產品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
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OsA-CL細胞系相關產品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
H-1581細胞系相關產品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
NS-20Y細胞系相關產品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
Jijoye細胞系相關產品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
PFSK-1細胞系相關產品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
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RCC10RGB細胞系相關產品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
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H-446細胞系相關產品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
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Hs840T細胞系相關產品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
NCI H2106細胞系相關產品：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
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Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
PaTu 8988 S細胞系相關產品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
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P30 OHK細胞系相關產品：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
SUP T1細胞系相關產品：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
Panc203細胞系相關產品：SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
LAN1細胞系相關產品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
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BCP-1細胞系相關產品：P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
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KU 812F細胞系相關產品：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
GM03569B細胞系相關產品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
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PANC-08-13細胞系相關產品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
B16細胞系相關產品：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
D407細胞系相關產品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
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LCD細胞系相關產品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
SW-954細胞系相關產品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
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CCD 841 CoTr細胞系相關產品：COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
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Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關產品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
WEHI-3B Lymphoblastoid cells小鼠髓樣單核白血病細胞系
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NCI-H510A細胞系相關產品：G-292 clone A141B1細胞、Eph4 1424細胞、P3X63-Ag8.653細胞
HPDLF細胞系相關產品：HCC2935細胞、H322細胞、Tb 1 Lu細胞
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