"NK-92MI Lymphoblastoid cells人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞背景資料：NK細胞；淋巴瘤；男性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
細胞生長：懸浮
NK-92MI Lymphoblastoid cells人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
A549-Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NK-92MI Lymphoblastoid cells人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
BDCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML2細胞、Plaepi 34細胞、SUIT-2細胞
DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
NK-92MI Lymphoblastoid cells人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
MRC 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞
T/G HA VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞
NCI-SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
HL-60 clone15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞
H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
U-138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
LM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
PK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
MCF/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
S37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
NeHepLxHT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
95-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
COLO_320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
NK-92MI Lymphoblastoid cells人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細胞、H-2023細胞、HEK-AD293細胞
KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細胞、T-98細胞、NTera 2細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、SBC-3細胞、MOLT-16細胞
"