"SU-DHL-10 Lymphoblastoid cells人B細胞淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 E.L.4細胞系相關產(chǎn)品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞 COLO-320HSR細胞系相關產(chǎn)品:UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞 WERI-Rb1細胞系相關產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞 細胞生長:懸浮 SU-DHL-10 Lymphoblastoid cells人B細胞淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 ACC-3細胞系相關產(chǎn)品:4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞 AZ 521細胞系相關產(chǎn)品:A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞 RT 112細胞系相關產(chǎn)品:PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞 TMD-8細胞系相關產(chǎn)品:293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞 CT 26細胞系相關產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SU-DHL-10 Lymphoblastoid cells人B細胞淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! C38細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞 KCL22S細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞 OPM2細胞系相關產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞 SNU878細胞系相關產(chǎn)品:L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞 HBZY 1細胞系相關產(chǎn)品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞 HepG2-luc細胞系相關產(chǎn)品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞 BMF細胞系相關產(chǎn)品:TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞 HCT-GEO細胞系相關產(chǎn)品:SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞 SLK細胞系相關產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞 LNT-229細胞系相關產(chǎn)品:H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞 SU-DHL-10 Lymphoblastoid cells人B細胞淋巴瘤細胞系 SNU387細胞系相關產(chǎn)品:3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞 JHH-2細胞系相關產(chǎn)品:MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞 NALM6細胞系相關產(chǎn)品:Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞 MEF細胞系相關產(chǎn)品:OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞 PLA801C細胞系相關產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞 GDM-1細胞系相關產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞 GDM-1細胞系相關產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞 Mouse podocyte細胞系相關產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 H-1963細胞系相關產(chǎn)品:CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞 HuH 6細胞系相關產(chǎn)品:UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞 RN-c細胞系相關產(chǎn)品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞 NCI-SNU-668細胞系相關產(chǎn)品:B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞 RPTC細胞系相關產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞 PJ34細胞系相關產(chǎn)品:P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞 IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞 GH 3細胞系相關產(chǎn)品:HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞 SW900細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞 DR2R1610細胞系相關產(chǎn)品:253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞 MFE280細胞系相關產(chǎn)品:EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞 BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞 YD15細胞系相關產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 MA-782細胞系相關產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞 HF-91細胞系相關產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞 SKMel-28細胞系相關產(chǎn)品:Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞 MKN45細胞系相關產(chǎn)品:TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞 UT-7細胞系相關產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞 COLO-HSR細胞系相關產(chǎn)品:H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞 OVCAR-8/ADR細胞系相關產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞 CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞 GM16136細胞系相關產(chǎn)品:RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞 HEYA8細胞系相關產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞 McA-RH 7777細胞系相關產(chǎn)品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞 OLN93細胞系相關產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞 Tu-212細胞系相關產(chǎn)品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞 BE(2)M17細胞系相關產(chǎn)品:Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞 RN-c細胞系相關產(chǎn)品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞 B16 F1細胞系相關產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞 HCC-1419細胞系相關產(chǎn)品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞 COLO 320 HSR細胞系相關產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞 NCI-SNU-119細胞系相關產(chǎn)品:NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞 ARO細胞系相關產(chǎn)品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞 OVCAR432細胞系相關產(chǎn)品:LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞 NCI-H520細胞系相關產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞 Bovine Turbinate細胞系相關產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞 KYSE0410細胞系相關產(chǎn)品:H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞 MX-1細胞系相關產(chǎn)品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞 SW 954細胞系相關產(chǎn)品:A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞 BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞 293-F細胞系相關產(chǎn)品:PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞 MHHCALL2細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞 NOR 10細胞系相關產(chǎn)品:Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞 SU-DHL-10 Lymphoblastoid cells人B細胞淋巴瘤細胞系 52PE細胞系相關產(chǎn)品:Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞 NK-92MI細胞系相關產(chǎn)品:SLMT1細胞、CTV-1細胞、HEK-293H細胞 NB19-RIKEN細胞系相關產(chǎn)品:MODE-K細胞、KHYG細胞、IOSE-80細胞 OPM2細胞系相關產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、NCI-H747細胞、MCF7-GFP細胞 "
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