"TALL-1 [Human adult T-ALL] Lymphoblastoid cells急性T淋巴細胞白血病細胞系 細胞背景資料:該細胞源于一名復發(fā)T-ALL(急性T淋巴細胞性白血?。┑膬和耐庵苎痪哂泻軓姷募毎拘?,體內(nèi)體外實驗中都能破壞腫瘤細胞;IL-2可使細胞更好地生長;α/β TCR陽性,γ/δ TCR陰性;可產(chǎn)生IFNγ、TNF-α和GM-CSF。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞 HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞 SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞 細胞生長:懸浮 TALL-1 [Human adult T-ALL] Lymphoblastoid cells急性T淋巴細胞白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:維持細胞密度在4×105-1×106 cells/ml之間,2-3天換液1次 Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞 A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞 ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞 RPPVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 TALL-1 [Human adult T-ALL] Lymphoblastoid cells急性T淋巴細胞白血病細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 KYSE30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞 CAMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞 B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞 MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞 Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87細胞、SNU761細胞、3396細胞 IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞 HCC70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞 RPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞 251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞 HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞 TALL-1 [Human adult T-ALL] Lymphoblastoid cells急性T淋巴細胞白血病細胞系 HD11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞 NCIH2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞 WM115mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞 PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞 H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞 OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞 OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞 Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞 AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞 HCC1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞 Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞 End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞 Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞 MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞 SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞 Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞 OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞 M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞 HS-695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞 HS-695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞 BALB/3T3 cl. A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞 KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞 SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞 Renal Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞 H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞 Panc8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞 TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞 NBL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞 Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞 U-87MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞 Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞 SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞 CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞 C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞 H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞 LN-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞 HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞 Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞 HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞 Evsa T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞 VeroC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞 SK-MEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞 M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞 H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞 526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞 NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞 L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞 4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞 Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞 H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞 BxPC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞 TALL-1 [Human adult T-ALL] Lymphoblastoid cells急性T淋巴細胞白血病細胞系 H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞 Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-F細胞、NCI-SNU-423細胞、NCTC clone 929細胞 YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEp-2細胞、TGBC-11-TKB細胞、SW1116細胞 B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細胞、Hs 766細胞、PANC-03-27細胞 "
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