"Karpas-422 Lymphoblastoid cells人類B細胞淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 HT 144細胞系相關產(chǎn)品:CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞 KALS-1細胞系相關產(chǎn)品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞 BL2141細胞系相關產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞 細胞生長:懸浮 Karpas-422 Lymphoblastoid cells人類B細胞淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KS-SLK細胞系相關產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞 Swiss 3T6細胞系相關產(chǎn)品:GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞 HCC1419細胞系相關產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞 PC 61細胞系相關產(chǎn)品:CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞 REC1細胞系相關產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Karpas-422 Lymphoblastoid cells人類B細胞淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 BE2-C細胞系相關產(chǎn)品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞 NTERA-2/D1細胞系相關產(chǎn)品:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞 G-Olig2細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞 NCI-747細胞系相關產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞 Colo-206F細胞系相關產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞 TOV21細胞系相關產(chǎn)品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞 SN12-PM6細胞系相關產(chǎn)品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞 LS-123細胞系相關產(chǎn)品:Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞 RIN-m細胞系相關產(chǎn)品:MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞 NTera2/D1細胞系相關產(chǎn)品:PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞 Karpas-422 Lymphoblastoid cells人類B細胞淋巴瘤細胞系 Metastatic Variant 522細胞系相關產(chǎn)品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞 MDCK-2細胞系相關產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 OCI-AML5細胞系相關產(chǎn)品:JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞 GA-10 clone 4細胞系相關產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞 CHO Lec1細胞系相關產(chǎn)品:Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞 SW626細胞系相關產(chǎn)品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞 SW626細胞系相關產(chǎn)品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞 JB 6細胞系相關產(chǎn)品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞 H-220細胞系相關產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞 Pt K2細胞系相關產(chǎn)品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞 Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞 SACC-83細胞系相關產(chǎn)品:LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞 Calu-6細胞系相關產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞 HCC1954細胞系相關產(chǎn)品:MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞 A549 ATCC細胞系相關產(chǎn)品:ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞 Madin Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞 OVCAR8/ADR細胞系相關產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞 B16F0細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞 H-1092細胞系相關產(chǎn)品:Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞 UACC 812細胞系相關產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞 IPAM-WT細胞系相關產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞 P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞 L363細胞系相關產(chǎn)品:alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞 MFE296細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞 Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 SC1細胞系相關產(chǎn)品:H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞 A-2780細胞系相關產(chǎn)品:H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞 MCA 205細胞系相關產(chǎn)品:SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞 TO175T細胞系相關產(chǎn)品:CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞 ssMCF7細胞系相關產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞 LLC-PK(1)細胞系相關產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞 b.End3細胞系相關產(chǎn)品:Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞 MKN28細胞系相關產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞 Hs 840.T細胞系相關產(chǎn)品:SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞 CCD19Lu細胞系相關產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞 OV2008細胞系相關產(chǎn)品:NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞 SK-MEL-24細胞系相關產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞 SK-MEL-24細胞系相關產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞 C-6細胞系相關產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞 PTK 2細胞系相關產(chǎn)品:COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞 SVEC 4-10細胞系相關產(chǎn)品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞 SUSM1細胞系相關產(chǎn)品:SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞 BALB/3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品:CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞 293S細胞系相關產(chǎn)品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞 MH-22a細胞系相關產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞 NCI-H1648細胞系相關產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞 KASUMI6細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞 PL-12細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 HUT-28細胞系相關產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞 CMT-64細胞系相關產(chǎn)品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞 Karpas-422 Lymphoblastoid cells人類B細胞淋巴瘤細胞系 Lieming Xu-2細胞系相關產(chǎn)品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞 52PE細胞系相關產(chǎn)品:Panc04.03細胞、Hs 821.T細胞、BHP 10-3細胞 HEK293-H細胞系相關產(chǎn)品:SKNMC細胞、JM-Jurkat細胞、Jurkat-77細胞 GNM細胞系相關產(chǎn)品:SW579細胞、MPC5細胞、H7721細胞 "
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