"U266B1 Lymphoblastoid cells人外周淋巴細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! HMEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞 NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞 CAL 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞 細(xì)胞生長:懸浮 U266B1 Lymphoblastoid cells人外周淋巴細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代 VMM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞 NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞 RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞 SVOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細(xì)胞、HCC94細(xì)胞、B10BR細(xì)胞 DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 U266B1 Lymphoblastoid cells人外周淋巴細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞 CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞 H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞 Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞 NCI-H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292 clone A141B1細(xì)胞、H209細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞 Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞 OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞 3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞 253J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、RT4P細(xì)胞 NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞 U266B1 Lymphoblastoid cells人外周淋巴細(xì)胞系 VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞 EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞 A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞 H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞 D341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞 CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞 CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞 CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞 HCT/Taxo1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞 Cor L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞 SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞 MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞 HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞 Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞 LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 739.T細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、H2330細(xì)胞 NCIH1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW2細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞 NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞 Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞 RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞 ACT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2-Ad細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、H1688細(xì)胞 OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞 OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞 MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞 Hs870T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞 Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞 HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1838細(xì)胞、H157細(xì)胞、SK 1細(xì)胞 HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞 H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞 Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞 NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞 NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞 Hs819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細(xì)胞、H-524細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞 NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞 HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞 QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞 H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞 H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞 EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞 TE-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞 H-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細(xì)胞、MV4II細(xì)胞、P388細(xì)胞 MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞 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