"MC116 Lymphoblastoid cells人(未分化的)淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 RC13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞 NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞 MSCs(mUCMSCs)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞 細胞生長:懸浮 MC116 Lymphoblastoid cells人(未分化的)淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:每周換液2-3次。 Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞 NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞 NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞 NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞 NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MC116 Lymphoblastoid cells人(未分化的)淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞 C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞 TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞 NPC-TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞 16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞 WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞 Kelly細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞 H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞 Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞 RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞 MC116 Lymphoblastoid cells人(未分化的)淋巴瘤細胞系 Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞 NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞 MKN-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞 AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞 WM-2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞 CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞 CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞 Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞 Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞 HeLa-S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、P3-X63-Ag8細胞、SW 579細胞 SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞 Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞 NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞 GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞 MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞 GA-10 (Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞 BT474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞 BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞 LN-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞 MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞 MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞 A375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞 Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞 HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞 OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞 SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞 L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞 NCI-H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞 AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞 RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞 NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞 OCI-Ly 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞 LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞 H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞 LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞 IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞 SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞 BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞 U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞 P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞 H-1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞 SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞 CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞 Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞 ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞 HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞 MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞 Kit225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞 GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞 UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞 PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞 MC116 Lymphoblastoid cells人(未分化的)淋巴瘤細胞系 Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞 Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、VK2/E6E7細胞、PFSK-1細胞 L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、RT-BM-1細胞、NCIH522細胞 TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SupB15WT細胞、NU-GC-3細胞 "
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