"HT Lymphoblastoid cells人混合淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 WM266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞 CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞 BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞 細胞生長:懸浮 HT Lymphoblastoid cells人混合淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:每2-3天換液 NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞 LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞 Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞 C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞 HCCC-9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HT Lymphoblastoid cells人混合淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 NCTC 3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞 HCC-1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞 OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞 KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞 SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞 LK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞 NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞 U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞 CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞 ZR7530細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞 HT Lymphoblastoid cells人混合淋巴瘤細胞系 LED-WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞 Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞 ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞 H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 Pt-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞 GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞 HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞 C-127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞 IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞 SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞 HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞 NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞 NIH/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞 HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞 RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞 NCI-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞 HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞 HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞 MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞 FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞 TOV21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞 HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞 Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞 IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞 L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞 LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞 BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞 EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞 RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞 TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞 SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞 NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞 P560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞 Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞 OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞 SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞 Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞 FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞 GM04678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞 PG [Human lung carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞 NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞 HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞 OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞 NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞 HIEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞 HT Lymphoblastoid cells人混合淋巴瘤細胞系 Panc 03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞 MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、Li-7細胞、C-33 A細胞 Hs-600-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細胞、MDAMB157細胞、CCC-ESF-1細胞 OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細胞、HOP92細胞、HCV-29細胞 "
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