"BCP-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! OUMS27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞 Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞 MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細(xì)胞、H184A1細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮 BCP-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。 細(xì)胞傳代方法:維持細(xì)胞濃度在2×105/ml-1×106/ml;根據(jù)細(xì)胞濃度每2-3天補(bǔ)液1次。 KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞 SNUC2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞 NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞 VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞 OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 BCP-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞 H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞 A427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoN細(xì)胞、SW 954細(xì)胞、RH-35細(xì)胞 P3/ag細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECCL-1細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞 SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞 HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞 B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞 Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞 Line 697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 226細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞 DU145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞 BCP-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞 INS1-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞 526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞 Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞 Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞 MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞 MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞 FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞 GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞 WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞 SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞 HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞 RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞 Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細(xì)胞、HT細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞 WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞 alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞 H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞 HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞 EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞 H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞 Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞 Leukemia 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞 MHCC97H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melanoma 14細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞、H2030細(xì)胞 IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞 RBVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞 Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞 Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞 PL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 266細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞 RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞 MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞 HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞 U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞 KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞 A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞 OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞 KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞 GM3190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細(xì)胞、C17.2細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞 SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞 MSTO-211 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1666細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞 CMT 167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞 H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞 GM03573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、GM03320細(xì)胞、H-2141細(xì)胞 Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞 Hu-P-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV362細(xì)胞、697細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞 NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞 P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞 H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞 VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞 LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞 Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞 RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞 BCP-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞 H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-562細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞 LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、H-2171細(xì)胞 A427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoN細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞 "
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