"EL4 Lymphoblastoid cellsEL4小鼠淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:EL4是從用9,10-二甲基-1,2-并蒽在C57BL小鼠中誘導的淋巴瘤中建立的。 能抗0.1 mM 化可的松,對20 mcg/ml PHA敏感。 還有一個亞株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! HBL100細胞系相關產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞 HNE-1細胞系相關產(chǎn)品:SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞 Daoy細胞系相關產(chǎn)品:KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞 細胞生長:懸浮 EL4 Lymphoblastoid cellsEL4小鼠淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2傳代 Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞 HLCL9B10細胞系相關產(chǎn)品:HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞 Hs 746T細胞系相關產(chǎn)品:APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞 J-774A.1細胞系相關產(chǎn)品:CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞 DHL10細胞系相關產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 EL4 Lymphoblastoid cellsEL4小鼠淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 TE-15細胞系相關產(chǎn)品:MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞 NCIH1651細胞系相關產(chǎn)品:KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞 H9c2(2-1)細胞系相關產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞 COLO 320DM細胞系相關產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞 GM00215細胞系相關產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞 KMS26細胞系相關產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 NCI-H2052細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞 H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞 MN9D細胞系相關產(chǎn)品:U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞 WEHI-3B細胞系相關產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞 EL4 Lymphoblastoid cellsEL4小鼠淋巴瘤細胞系 H2023細胞系相關產(chǎn)品:SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞 HOS-TE85細胞系相關產(chǎn)品:SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞 HCC1954 BL細胞系相關產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞 EBNA293細胞系相關產(chǎn)品:HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞 IAR20細胞系相關產(chǎn)品:SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞 Alexander細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞 Alexander細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞 SW 1417細胞系相關產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞 hRMECs細胞系相關產(chǎn)品:HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞 LNCaP subline C4-2細胞系相關產(chǎn)品:Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞 Nb2a細胞系相關產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞 WM 239細胞系相關產(chǎn)品:PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞 HRA19細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞 GAK細胞系相關產(chǎn)品:RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞 MNNG-HOS細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞 LLC-PK1細胞系相關產(chǎn)品:TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞 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26細胞 Tca-8113細胞系相關產(chǎn)品:KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞 NCI-H2085細胞系相關產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞 EM-3細胞系相關產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞 NCM-460細胞系相關產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞 A-704細胞系相關產(chǎn)品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞 MDA453細胞系相關產(chǎn)品:EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞 TK10細胞系相關產(chǎn)品:KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞 CNE1細胞系相關產(chǎn)品:OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞 H2347細胞系相關產(chǎn)品:ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞 ketr 3細胞系相關產(chǎn)品:HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞 MESSA-DX5細胞系相關產(chǎn)品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞 KMS-26細胞系相關產(chǎn)品:ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞 RBL 1細胞系相關產(chǎn)品:DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞 Colo16細胞系相關產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞 CCRF細胞系相關產(chǎn)品:EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞 HGC27細胞系相關產(chǎn)品:SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞 EL4 Lymphoblastoid cellsEL4小鼠淋巴瘤細胞系 ME16C細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞 HCC-1588細胞系相關產(chǎn)品:H-2087細胞、Swiss-3T3細胞、KRCY細胞 BIU-87細胞系相關產(chǎn)品:HUT 28細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、NCIH128細胞 H9c2 (2-1)細胞系相關產(chǎn)品:HT clone H9細胞、HCC-1438細胞、HNE1細胞 "
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