"Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:Raji細胞由PulvertaftRJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的,是個人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細胞,為B細胞起源。該細胞中含有EBV,需要在二級生物安全柜中操作;可作轉(zhuǎn)染宿主。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞 CaEs17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8-653細胞、SU-DHL-4細胞、B16/BL6細胞 CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞 細胞生長:懸浮 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:維持細胞濃度在4×105/ml-3×106/ml;根據(jù)細胞濃度每2-3天補液1次。 LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞 BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞 AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞 D-324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞 JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞 Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞 Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞 LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞 Meat Animal Research Center-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞 C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞 NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞 BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞 Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤細胞系 H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞 GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞 VMM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞 OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞 MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞 C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞 C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞 COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞 Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞 C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞 OV-2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞 HEK-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞 RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞 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QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞 HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞 BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞 NMCG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞 OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞 CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞 SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞 DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞 FAO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞 A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞 A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞 NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞 OV433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞 SHIN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞 JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞 PANC-04-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞 LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞 OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞 MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞 SCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞 HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞 RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞 Okayama University Medical School-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤細胞系 Caco2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞 NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細胞、UCLA-RO 81細胞、Panc 10.05細胞 NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、TW01細胞 Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoC1細胞、253J B-V細胞、SK-RC 52細胞 "
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