"RA-FLSs fibroblast cells類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞背景資料：關節(jié)；成纖維細胞
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
OVCA-432細胞系相關產(chǎn)品：MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞
MDA-MB468細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
ME1細胞系相關產(chǎn)品：TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
細胞生長：貼壁
RA-FLSs fibroblast cells類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結構，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
OC316細胞系相關產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
C-4-I細胞系相關產(chǎn)品：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
HR-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
MDA-435細胞系相關產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RA-FLSs fibroblast cells類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
L-6TG細胞系相關產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
T1-73細胞系相關產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
PNEC30細胞系相關產(chǎn)品：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
LS411細胞系相關產(chǎn)品：H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
NCI-H1688細胞系相關產(chǎn)品：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
NCI-H1869細胞系相關產(chǎn)品：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
Hce8693細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
SW-948細胞系相關產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
HEC-1A細胞系相關產(chǎn)品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關產(chǎn)品：NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
RA-FLSs fibroblast cells類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
SU-86-86細胞系相關產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
T 98 G細胞系相關產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
MRC-5細胞系相關產(chǎn)品：Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產(chǎn)品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
ketr 3細胞系相關產(chǎn)品：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
HEL-92細胞系相關產(chǎn)品：Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
HEL-92細胞系相關產(chǎn)品：Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
MyLa 2059細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
COLO-320DM細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
NCIH510細胞系相關產(chǎn)品：N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞
TOV112D細胞系相關產(chǎn)品：MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞
MDA175細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL28細胞、HN6細胞、MDA-MB-435細胞
HTori 3細胞系相關產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
HCC0038細胞系相關產(chǎn)品：U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞
MES-23.5細胞系相關產(chǎn)品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
H-1395細胞系相關產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
Anip[973]細胞系相關產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
H-740細胞系相關產(chǎn)品：UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
SV40 MES 13細胞系相關產(chǎn)品：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
RPMI 7951細胞系相關產(chǎn)品：X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
BAR-T細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
HuH-6細胞系相關產(chǎn)品：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
H341細胞系相關產(chǎn)品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
LAD2細胞系相關產(chǎn)品：IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
COLO 320 DM細胞系相關產(chǎn)品：HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
HT 1376細胞系相關產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
U266BL細胞系相關產(chǎn)品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
IALM細胞系相關產(chǎn)品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
CHP212細胞系相關產(chǎn)品：CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞
NB-9細胞系相關產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
293-EBNA1細胞系相關產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
HOP 92細胞系相關產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
RD細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
Hs 695T細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
H735細胞系相關產(chǎn)品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
NIH3T3細胞系相關產(chǎn)品：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關產(chǎn)品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
ROS-17/2.8細胞系相關產(chǎn)品：MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
H1092細胞系相關產(chǎn)品：MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
OVCAR10細胞系相關產(chǎn)品：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
CCD-33Co細胞系相關產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
MCF-7B細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
PLB-985細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
MDCK II細胞系相關產(chǎn)品：SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
OCM1A細胞系相關產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
WiDrTC細胞系相關產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
HuP-T4細胞系相關產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
RA-FLSs fibroblast cells類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
MIHA細胞系相關產(chǎn)品：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
CL40細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Y 1細胞、EU-3細胞
Rat 1細胞系相關產(chǎn)品：HMrSV5細胞、RCC-JF細胞、RCC23細胞
PNEC30細胞系相關產(chǎn)品：Ly7細胞、KLN-205細胞、F9細胞
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