"EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:腹水瘤 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 KYSE-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞、BTT739細(xì)胞 D10.G4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞 Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞 Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞 T 98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細(xì)胞、MLA144細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞 MUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞 KHYG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:半貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞、MLFC細(xì)胞 BCAP37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞、GM00637細(xì)胞 GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞 H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞 NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞 NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞 118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞 Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞 BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞 NCI-H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H2170細(xì)胞 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細(xì)胞系 OV-CA 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、OP-9細(xì)胞 FO [Mouse myeloma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/Fujioka細(xì)胞、Colo16細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞 3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞 NOZC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞 NCI-H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞 HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞 HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞 DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞 18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞 UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞 Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞 CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞 NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞 OVCAR 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM/S細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞、JIMT細(xì)胞 KP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832.Tc細(xì)胞、PAa細(xì)胞、NRCC細(xì)胞 SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞 H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞、GB-1細(xì)胞 PK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-BE1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞 H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞 H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞 MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞 NCIH1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細(xì)胞、D341細(xì)胞、T. T細(xì)胞 NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞 NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞 AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞 Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞 High 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞 KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞 B-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320DM細(xì)胞、SaOS細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞 BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞 UMR106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞 CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞 Tu 177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞 TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞 Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞 MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞 SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞 TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞 PC3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞 NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞 NB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞 ELD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞 Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞 L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞 FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞 P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞 HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞 AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞 RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞 BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細(xì)胞系 Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞 A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞 H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞 GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH660細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、HCC366細(xì)胞 "
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