"NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:神經(jīng)干細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞 NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞 Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP 1細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CMT 167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞 OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞 16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞 KYSE 270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP92細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞、G-361細(xì)胞 Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞 Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞 CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞 Walker 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞 C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞 RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞 H-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSU-Pr1細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞 SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞 CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞 UM-UC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞 NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細(xì)胞系 Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞 NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞 NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞 PC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIMVEC細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞 NCI-H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞 Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞 Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞 CW-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2066細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞 CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞 ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞 R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞 WM115-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt3A細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞 LO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞 SW 626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞 MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞 SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞 NCI-H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-T4細(xì)胞、MCA205細(xì)胞、BT 20細(xì)胞 Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞 H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFSF細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、HBE細(xì)胞 RBL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞 MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞 BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞 SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞 HUT125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE 12細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞 293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞 H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞 GC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞 3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞 HARAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞 COLO 206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞 HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞 H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞 HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞 OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞 28SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-ESF-1細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞、COLO201細(xì)胞 Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞 NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞 Toledo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細(xì)胞、H-295細(xì)胞、KP4細(xì)胞 OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞 NCI-SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞 OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞 Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞 TR-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞 Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞 BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞 MEG01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞 BT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞 H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞 SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞 University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞 NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細(xì)胞系 SRS-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC-1細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、AR41P細(xì)胞 MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 111細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞 CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細(xì)胞、M-14細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞 "
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