"NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)干細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
NCI-H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞
細胞生長：貼壁
NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
OVCA433_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
16-HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
KYSE 270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
CP-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞
Walker 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
UM-UC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細胞系
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
WM115-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞
MV4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
SK-NEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
NCTC929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
Toledo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
MEG01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
NE-4C epithelioid cells小鼠神經(jīng)干細胞系
SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細胞、Caco-2/BBe 1細胞、AR41P細胞
MEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細胞、Sp2/0-Ag14細胞、SK Mel 1細胞
CP-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-H細胞、M-14細胞、NPA'87細胞
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