"BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細胞系 細胞背景資料:腎;自發(fā)永生 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 NCIH1355細胞系相關產品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞 HCC366細胞系相關產品:L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞 293F細胞系相關產品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞 細胞生長:貼壁 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據細胞株數據單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內。依據細胞種類和濃度,于無菌操作臺內取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H810細胞系相關產品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞 Sp2/0-Ag-14細胞系相關產品:H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞 H-2126細胞系相關產品:A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞 Saos2細胞系相關產品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞 GA-10 clone 4細胞系相關產品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 Nittby-Salford 1細胞系相關產品:FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞 2V6.11細胞系相關產品:IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞 ANA-1細胞系相關產品:RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞 ATN-1細胞系相關產品:Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞 University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關產品:GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞 SKMEL3細胞系相關產品:H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞 SW1783細胞系相關產品:HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞 A9細胞系相關產品:NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞 Glioma-261細胞系相關產品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞 HuT 102細胞系相關產品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細胞系 SK Col 1細胞系相關產品:KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞 PC-10細胞系相關產品:NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞 JHH7細胞系相關產品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞 IPEC-1細胞系相關產品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞 H-820細胞系相關產品:PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞 GM17346細胞系相關產品:A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞 GM17346細胞系相關產品:A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞 CCC-ESF-1細胞系相關產品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞 U373細胞系相關產品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞 H2228細胞系相關產品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞 R 1610細胞系相關產品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 MCF-10 Attached細胞系相關產品:NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞 Vero C1008細胞系相關產品:COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞 TCCPAN2細胞系相關產品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞 CHAGOK1細胞系相關產品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞 NCI-H650細胞系相關產品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞 SNU-886細胞系相關產品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞 LX-2細胞系相關產品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 WM115F細胞系相關產品:WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞 Hi-five細胞系相關產品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞 ROS17/28細胞系相關產品:Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞 SW837細胞系相關產品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞 SW 48細胞系相關產品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞 NK92-MI細胞系相關產品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞 BRL3A細胞系相關產品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞 253J B-V細胞系相關產品:MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞 BAEC細胞系相關產品:C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關產品:SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞 HBVP細胞系相關產品:NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞 H28細胞系相關產品:H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞 Tn5 B1-4細胞系相關產品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞 CCRF-CEM C1細胞系相關產品:HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞 TE7細胞系相關產品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞 MS-751細胞系相關產品:H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞 MARC145細胞系相關產品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞 MN 60細胞系相關產品:NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞 C1R細胞系相關產品:HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞 RS(4;11)細胞系相關產品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞 108CC15細胞系相關產品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞 SCL-II細胞系相關產品:C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞 Vero 76 clone E-6細胞系相關產品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞 MILE SVEN1細胞系相關產品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關產品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞 HN-6細胞系相關產品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞 OVCA-433細胞系相關產品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞 COLO 357細胞系相關產品:MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞 AD293細胞系相關產品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞 MC57細胞系相關產品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞 IM95細胞系相關產品:CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞 CT26WT細胞系相關產品:RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞 BSC40 epithelioid cells非洲綠猴腎細胞系 L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品:ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞 SVOG細胞系相關產品:Panc-1-P細胞、P-2003細胞、HEC-1A細胞 Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產品:SupT1細胞、NCIADRRES細胞、MNNG-HOS細胞 ANA-1細胞系相關產品:RBE4細胞、H820細胞、HUT-28細胞 "
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