"HCCLM6 epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞背景資料:肝癌 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 mRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞 SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞 SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞 細胞生長:貼壁 HCCLM6 epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞 CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞 PANC-03-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞 CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HCCLM6 epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認(rèn)為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞 GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞 HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞 D562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞 8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞 COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞 SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞 BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞 NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞 MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞 HCCLM6 epithelioid cells人肝癌細胞系 C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞 Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞 HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞 CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞 KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞 OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞 OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞 SKGIIIA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞 BC3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞 H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞 Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞 CCC-HPF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞 KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞 HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞 H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞 L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞 NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞 RPMI 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞 Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞 GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞 Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞 MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞 MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞 GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞 Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞 Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞 SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞 HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞 LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞 NPC-TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞 KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞 A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞 Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞 NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞 P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞 PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞 B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞 H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞 Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞 Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞 KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞 TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞 BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞 BC-3-H-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞 SK.MEL.28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞 Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞 MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞 HO-8910 PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞 MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞 MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞 HCCLM6 epithelioid cells人肝癌細胞系 H-2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞 NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKL細胞、H-2347細胞、NCIH1648細胞 4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細胞、CL34細胞、UCLA SO M14細胞 HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、KYSE 410細胞、Hs683細胞 "
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