"Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素細(xì)胞；自發(fā)永生；C５７BL/６
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
ARO 81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞
SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞
PGLH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-11細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞
SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
COLO679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EPC細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞、SCH細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
VM-CUB-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN-3細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞
H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞
FRH-0201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、H-125細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細(xì)胞系
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
QGY7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞
CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞
CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
SUM-159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細(xì)胞、HS5細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞
Hepatoma 22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190A細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
NCI H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞
GM05372細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細(xì)胞、HF-91細(xì)胞、FaDu細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
BC-PAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞
WPE-int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、BIC細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
SUM149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細(xì)胞、PA317細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞
EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞
CATH-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞
Melan-a epithelioid cells小鼠黑色素細(xì)胞系
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞
GLC-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2C12細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞
PA317細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
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