"PG13 epithelioid cells逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；成纖維細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過(guò)度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
PG13 epithelioid cells逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MDA MB 175 VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞
NIH:OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori:3細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞
MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞
SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞
L 428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU475細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞、QGP1細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
MLFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、MM1細(xì)胞
RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
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HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
EoL-1 cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746-T細(xì)胞、NGP細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞
NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
MDA436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR106細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞
PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞
Hs-852-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
CX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH7777細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞、H-716細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞
HUCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞
SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞
OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
SK-N-BE(2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞
NK10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu 80細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞
VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
BEL-7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5-8F細(xì)胞、P-36細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞
KPL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細(xì)胞、WML2細(xì)胞、ABC1細(xì)胞
OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBEo細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞、R 1610細(xì)胞
SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
PG13 epithelioid cells逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞系
HSC 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細(xì)胞、YES2細(xì)胞、SNU368細(xì)胞
VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細(xì)胞、ID8細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞、PC3細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞
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