"HOP-62 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:肺癌;女性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 KTA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細(xì)胞、M07e細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞 HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞 RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多,下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺(tái)/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時(shí),一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時(shí)就必須配備一臺(tái)-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對于不需要長期凍存的細(xì)胞,可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞 SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞 MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞 CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞 HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞 95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞 H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞 DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞 KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞 NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞 H4-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞 U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞 NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞 T84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2780細(xì)胞、KU 812細(xì)胞、GTL16細(xì)胞 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞 TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞 CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞 FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞 SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞 P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞 CAL62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞 NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞 CD 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞 Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞 WRL 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞 CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞 HuT-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞 GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞 MV411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞 343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞 NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞 TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞 DI TNC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細(xì)胞、KP-4細(xì)胞、SW948細(xì)胞 C-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞 G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞 Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞 TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞 CCFSTTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞 RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞 KYSE510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞 SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞 H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞 H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞 NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞 HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞 SkChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細(xì)胞、H-146細(xì)胞、LU165細(xì)胞 MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞 BEL7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞 28SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-ESF-1細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞、COLO201細(xì)胞 SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞 Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞 TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞、GL-261細(xì)胞 MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞 SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞 OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞 HS852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞 NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞 LYR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL6細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、HSC6細(xì)胞 RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞 RKOAS451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H-2141細(xì)胞、H-820細(xì)胞 ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、U373MG細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞 SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞 HCC-1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞 HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞 SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞 HOP-62 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞 IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、tdott細(xì)胞 HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、KNS62細(xì)胞 H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞 "
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