"CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內皮細胞系
細胞背景資料：肺血管；內皮細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
SCC15細胞系相關產品：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
HEK;293細胞系相關產品：HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞
1.1B4細胞系相關產品：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
細胞生長：貼壁
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NG10815細胞系相關產品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
NCI-H1954細胞系相關產品：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
SW 1222細胞系相關產品：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
PC9細胞系相關產品：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞
293-GP細胞系相關產品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內皮細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的完全培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室。
MES-23.5細胞系相關產品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
HELA-GFP細胞系相關產品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
KE39細胞系相關產品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
TE-3A細胞系相關產品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關產品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
U118細胞系相關產品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關產品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
HeLa229細胞系相關產品：RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
LTEPa2細胞系相關產品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
H2081細胞系相關產品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內皮細胞系
NCIH847細胞系相關產品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
SU-DHL-1細胞系相關產品：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
F442-A細胞系相關產品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
HCC202細胞系相關產品：NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
NALM-6細胞系相關產品：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
RDES-1細胞系相關產品：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
HSMC細胞系相關產品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關產品：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
RERFLCMS細胞系相關產品：DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
SW 480細胞系相關產品：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
MC9細胞系相關產品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
Mo 59J細胞系相關產品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
CL-40細胞系相關產品：HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
SLMT-1細胞系相關產品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
EOC-20細胞系相關產品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
GOTO細胞系相關產品：MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞
PC-9細胞系相關產品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
KM12 SM細胞系相關產品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
PA12細胞系相關產品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
DLM8細胞系相關產品：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
OCM-1細胞系相關產品：BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
T-84細胞系相關產品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
GM03573A細胞系相關產品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
SUM-159-PT細胞系相關產品：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞
PaCa2細胞系相關產品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
Panc 8.13細胞系相關產品：BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞
HPAEpiC細胞系相關產品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
HPAFII細胞系相關產品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關產品：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
TE8細胞系相關產品：RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
QGY7703細胞系相關產品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
NCIH929細胞系相關產品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
TGW-nu細胞系相關產品：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
PLB 985細胞系相關產品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
CNE2Z細胞系相關產品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
BrCL15細胞系相關產品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
CHO cell clone K1細胞系相關產品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
BC3H1細胞系相關產品：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
HEK 293FT細胞系相關產品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
NBLAN5T細胞系相關產品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
SNG-M細胞系相關產品：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
COC1/CDDP細胞系相關產品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
TE-85細胞系相關產品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
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FOX-NY細胞系相關產品：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞
KYSE 180細胞系相關產品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
Anip 973細胞系相關產品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
IEC 18細胞系相關產品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內皮細胞系
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