"LA-4 [Mouse lung adenoma] epithelioid cells小鼠肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:肺癌;A/He 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 HS0578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells (TK-)細(xì)胞、TK 10細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞 SNGM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞 CT26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-EMC-SS細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、H-526細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 LA-4 [Mouse lung adenoma] epithelioid cells小鼠肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RMG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞 H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞 OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞 H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞 Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 LA-4 [Mouse lung adenoma] epithelioid cells小鼠肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞 N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDSMC細(xì)胞、Th17細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞 Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞 PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞 HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞 HEK-293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞 DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI6細(xì)胞、C22細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞 L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞 3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞 LA-4 [Mouse lung adenoma] epithelioid cells小鼠肺癌細(xì)胞系 NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞 Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞 IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞 H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞 MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞 BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞 BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞 MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞 HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞 NCI-H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 403細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞、MFC細(xì)胞 NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞 SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞 BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞 H-2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞 H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細(xì)胞、OC-316細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞 HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞 BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞 NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞 KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞 P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞 RWPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞 H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞 16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞 SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞 UM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞 HCC0070細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞 X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞 HS578細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA-1細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞 786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞 NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞 ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞 B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞 Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞 MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞 HTR8svn細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9204細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞、HT-144細(xì)胞 University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞 T-HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞 NCIH23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞 PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞 Y3-Ag1,2,3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞 OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞 L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞 SUDHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H345細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞、H-676B細(xì)胞 KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞 NCI H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112D細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞 Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞 SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞 KHYG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞 PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞 MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞 Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞 LA-4 [Mouse lung adenoma] epithelioid cells小鼠肺癌細(xì)胞系 MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞 CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細(xì)胞、Z310細(xì)胞、HSC6細(xì)胞 OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞 Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞 "
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