"DrG epithelioid cells大鼠背根神經(jīng)細胞系 細胞背景資料:背根神經(jīng)細胞 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞 P3J-HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞 Hu-P-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞 細胞生長:貼壁 DrG epithelioid cells大鼠背根神經(jīng)細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PE CA PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞 Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞 HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞 M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞 Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 DrG epithelioid cells大鼠背根神經(jīng)細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞 MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞 T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞 KOSC-2 cl3-43細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞 SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞 HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞 NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞 Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞 SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞 LN299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞 DrG epithelioid cells大鼠背根神經(jīng)細胞系 LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞 LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞 NCI-H1668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞 PANC-10-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞 Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞 GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞 GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞 RAW264細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞 HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞 C57/B6-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs611T細胞、CCD-112CoN細胞、P3 88 D1細胞 IA-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞 MDA.MB.231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞 UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞 SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 SNU16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞 BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞 NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞 CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞 RIN Cl-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞 NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞 NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞 TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞 SKNBE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞 HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞 CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞 3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞 LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞 D283-MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞 GM 637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞 SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞 P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞 MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞 BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞 HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞 DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞 Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞 OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞 Glioma 261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞 Glioma 261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞 OP9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞 Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞 KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 HCC202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞 CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞 Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞 FF-WT-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞 MDA-MB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞 NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞 NCI-H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞 Human Hepatocyte Line 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞 JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞 DrG epithelioid cells大鼠背根神經(jīng)細胞系 RPMI-2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞 GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、HO-8910PM細胞、3 LL細胞 NCIH1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP-9細胞、QGP-1細胞、NCI-H358細胞 T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、SNU-368細胞、NCI-H2347細胞 "
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