"OV-1063 epithelioid cells人卵巢上皮細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:卵巢上皮細(xì)胞癌 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 C22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞 LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 739.T細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、H2330細(xì)胞 NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 OV-1063 epithelioid cells人卵巢上皮細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Capan1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-20細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞、HRMC細(xì)胞 H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞 RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞 AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞 THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 OV-1063 epithelioid cells人卵巢上皮細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞 Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞 H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞 HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞 NPA87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細(xì)胞、Y3細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞 OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞 HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞 BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞 LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞 OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞 OV-1063 epithelioid cells人卵巢上皮細(xì)胞癌細(xì)胞系 Hs870T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞 LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞 Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞 JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞 A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞 TM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞 HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞 MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞 Pfeiffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞 H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞 Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞 LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞 U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞 HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞 UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞 SUDHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX-1細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞、SKml2細(xì)胞 MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞 RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞 Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞 KYSE-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞 AE1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞 DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞 L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞 FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞 SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞 H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA12細(xì)胞、SW900細(xì)胞、H283細(xì)胞 COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞 SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞 COLO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞 SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞 H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞 NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞 MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞 MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞 H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞 Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞 HT144mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435細(xì)胞、HPAF細(xì)胞、CHL1細(xì)胞 F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞 NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞 TYK-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞 MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞 MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞 RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞 K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞 U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞 Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞 NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞 PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞 CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞 WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞 OV-1063 epithelioid cells人卵巢上皮細(xì)胞癌細(xì)胞系 RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞 MESSA-DX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-15細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞 SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞 H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞 "
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