"CAL-148 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞背景資料:乳腺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 3T3 J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞 LIXC002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞 MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞 細胞生長:貼壁 CAL-148 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞 MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞 HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞 SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞 L Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 CAL-148 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞 UT7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞 RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞 H2052_MM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞 SK-CO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞 W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞 EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞 BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞 TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞 G361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞 CAL-148 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞 Kit225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞 KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞 CCD18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞 BC3 H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞 OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞 OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞 SW-1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞 CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞 H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞 H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞 SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞 TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞 Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞 WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞 DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞 Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞 H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞 KP4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細胞、F9細胞、VP229細胞 Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞 EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞 TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞 Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞 Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞 EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞 Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞 mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞 SUDHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞 CNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞 KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞 SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞 ZR75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞 SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞 OCI-AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞 U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞 P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞 SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞 NKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞 NKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞 MHCC97H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞 MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞 KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞 A-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞 Caco 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞 H-2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞 NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞 NCI-H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞 NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞 SW403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞 K562/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞 GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞 CAL-148 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞 SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細胞、Hs 675.T細胞、hTERT-HPNE細胞 H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、SF763細胞、H-1882細胞 RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-1細胞、CMT-64細胞、MPC5細胞 "
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