"Rca-B epithelioid cells大鼠鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：鱗癌；SD大鼠
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞
32D clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A875細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、N-9細(xì)胞
CCD 966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS 751細(xì)胞、DHL8細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
Rca-B epithelioid cells大鼠鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Rca-B epithelioid cells大鼠鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
U20S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP-293細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞
TOV-112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECGI10細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞、Hs68細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞
Rca-B epithelioid cells大鼠鱗癌細(xì)胞系
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞
Metastatic Variant-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞
H-820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M IE8細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞
H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
D-283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞
Chinese Hamster Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1568細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
SK-RC 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞
SKMEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone 3細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞、RGC6細(xì)胞
BT-325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
PE/CA-PJ-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞
SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
IOSE-Mar細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞
MDA-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-CTRL細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞
alpha-TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 522細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞、Leydig細(xì)胞
REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
OV1/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞
343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞
AN3-CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
LNCaP C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞
Rca-B epithelioid cells大鼠鱗癌細(xì)胞系
BJA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞、BC-020細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、SNU520細(xì)胞
HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
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關(guān)鍵字： Rca-B epithelioid cells大鼠鱗癌細(xì)胞系
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