"RKO-AS45-1 epithelioid cells人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! MDA-MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞 ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞 Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞 細胞生長:貼壁 RKO-AS45-1 epithelioid cells人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞 PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞 Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞 OVCAR-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞 RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 RKO-AS45-1 epithelioid cells人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞 CEM-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞 NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞 H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞 NCIH1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞 B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞 B16-F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞 Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞 H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞 MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞 RKO-AS45-1 epithelioid cells人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系 NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞 9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞 MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞 MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞 PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞 AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞 IMR-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞 SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞 Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞 MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞 NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞 SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞 HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞 X63-AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞 N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞 Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞 PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞 NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞 FLC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞 M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞 Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞 Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞 CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞 RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞 SCC25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞 H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞 MCA38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞 Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞 NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞 SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞 PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞 FLC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞 3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞 NCI-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞 HA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞 hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞 SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞 alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞 WM239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞 LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞 DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞 DU_145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞 SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞 HEK293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞 OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞 CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞 EL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞 HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞 GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞 NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞 RKO-AS45-1 epithelioid cells人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系 2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞 A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細胞、NP-69細胞、OEC33細胞 SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、624-mel細胞 NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細胞、Granta 519細胞、HTR8細胞 "
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