"F81 epithelioid cells貓腎細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:腎;自發(fā)永生;雌性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞 P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞 COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 F81 epithelioid cells貓腎細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞 Tissue Culture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞、WC00059細(xì)胞 BERH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞 HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞 Reh細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA922細(xì)胞、BT-474細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 F81 epithelioid cells貓腎細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 UCLA RO-81A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞 SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞 RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞 SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞 A172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 8細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞 BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞 C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞 EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞 BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞 Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞 F81 epithelioid cells貓腎細(xì)胞系 MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞 Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞 JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞 G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞 373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞 Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞 Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞 3T6 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283-MED細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞、TI-73細(xì)胞 MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞 MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞 NCI-H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細(xì)胞、H-889細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞 Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞 hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞 NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞 BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞 GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞 MDAPCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112D細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞、HS-683細(xì)胞 LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞 Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞 High-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH446細(xì)胞、CL-40細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞 H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞 HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞 NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞 PAN 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞 C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞 SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞 DLM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFH細(xì)胞、U-343細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞 NCI-H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞 HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞 Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞 PANC1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細(xì)胞、N-87細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞 OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞 KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞 Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞 G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞 RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞 LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞 T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞 KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞 LC-1 sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞 HSC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 92細(xì)胞、Dami細(xì)胞、SNU620細(xì)胞 HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞 COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞 BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞 CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞 NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞 H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞 SW480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞 16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞 Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞 NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞 F81 epithelioid cells貓腎細(xì)胞系 HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞 NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac6細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞 C32-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLAG-66細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞 RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、FLS細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞 "
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