"HS-5 epithelioid cells人骨髓基質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞 EMT-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL2細(xì)胞、MCM細(xì)胞、GA-10細(xì)胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HS-5 epithelioid cells人骨髓基質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞 IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞 BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞 LLC PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞 NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HS-5 epithelioid cells人骨髓基質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 Calu 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞 T84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2780細(xì)胞、KU 812細(xì)胞、GTL16細(xì)胞 SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細(xì)胞、7860細(xì)胞、CAL120細(xì)胞 PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞 Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞 H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞 KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞 KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞 0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞 BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞 HS-5 epithelioid cells人骨髓基質(zhì)細(xì)胞系 Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞 NCI-H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細(xì)胞、COLO394細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞 RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞 Beta-TC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞 TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞 CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞 U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞 Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞 COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞 MDA-MB-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞 NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞 KPL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞 HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞 WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞 CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞 H-1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-442A細(xì)胞、C 6細(xì)胞、OC316細(xì)胞 BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞 D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞 RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞 SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞 OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞 IBRS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞 H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞 SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞 MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞 H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞 RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞 RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞 RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞 CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞 Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞 DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMA細(xì)胞、H719細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞 OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞 OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 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