"BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞 OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞 3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞、HMEC細(xì)胞 UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞 H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞 Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞 EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞 IMR 90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞 Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞 TB1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_HEP1細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞 P 815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細(xì)胞、SNU354細(xì)胞、EU-3細(xì)胞 aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞 CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞 L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC3細(xì)胞、M619細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞 PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞 A-427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、SL-1細(xì)胞 BIU-87 epithelioid cells人膀胱癌細(xì)胞系 Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞 H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞 CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞 HEK 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞 UMUC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞 NU-GC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞 WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞 OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞 FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細(xì)胞、C8161細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞 ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞 OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞 PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞 LTEP-s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞、TR 146細(xì)胞 CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞 SK_HEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞 HMO6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞 AtT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞 PA317細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 2 C細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞、H3396細(xì)胞 Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞 H-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki2細(xì)胞、H1155細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞 NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞 TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞 LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞 H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞 HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞 MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞 SV-HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞 MDST8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞 OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞 CEM-CCRF 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