"ECC12 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞 NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞 A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 ECC12 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞 H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞 87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞 CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、BV-2細(xì)胞、GM03320細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 ECC12 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實(shí)驗(yàn)時,喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞 OVCA5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞 N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞 CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞 PC-9S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK 10細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞 NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞 M-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞 SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞 OCI-AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞 NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞 ECC12 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞 NB-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞 C3H 10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細(xì)胞、H2126細(xì)胞、HCC44細(xì)胞 Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞 H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞 NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞 NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞 SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞 P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞 NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞 GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細(xì)胞、PC9細(xì)胞、CEL細(xì)胞 H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞 NCIH1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細(xì)胞、D341細(xì)胞、T. T細(xì)胞 Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞 P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞 Glioma 261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞 SW-1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/S3細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞 TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞 Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞 Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞 M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞 Mono Mac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞 P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞 HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞 VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞 HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞 BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞 MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞 U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞 NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞 CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞 SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞 IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞 OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞 OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞 OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞 HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞 SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132細(xì)胞、TE-5細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞 SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞 SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞 CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8-653細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞 NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞 SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞 Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞 KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞 MM1-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞 ECC12 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 Panc_04_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細(xì)胞、J 111細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞 KNS62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK-2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞 HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞 N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞 "
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