細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒
中文名稱:細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒
英文名稱:Senescence β-Galactosidase Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格:>100次
本試劑盒是一種基于衰老時(shí)SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上調(diào)而對(duì)衰老細(xì)胞或組織進(jìn)行染色檢測(cè)的試劑盒。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測(cè)到細(xì)胞或組織的衰老情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的衰老檢測(cè),也可以用于組織切片的衰老檢測(cè)。 試劑盒組份: β-半乳糖苷酶染色固定液—————100ml X-Gal溶液————————————5ml β-半乳糖苷酶染色液A——————1ml β-半乳糖苷酶染色液B——————1ml β-半乳糖苷酶染色液C——————100ml 絕大多數(shù)正常細(xì)胞被認(rèn)為僅有有限的分裂能力,在不能分裂后就進(jìn)入衰老(senescence)狀態(tài)。此時(shí)細(xì)胞仍然是存活的,但細(xì)胞的基因和蛋白的表達(dá)譜發(fā)生了很大改變。衰老(senescence)的細(xì)胞不能在一些常規(guī)的刺激下再誘導(dǎo)細(xì)胞分裂,并且衰老細(xì)胞的細(xì)胞周期分布也比較特殊,不同于一些損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞休眠,也不同于細(xì)胞生長(zhǎng)接觸抑制的情況。衰老細(xì)胞細(xì)胞通常體積變大,表達(dá)pH 6.0時(shí)有高酶活性的β-半乳糖苷酶。細(xì)胞衰老也被認(rèn)為是生物體抑制腫瘤的一種方式,同時(shí)也是生物體老化(aging)的一種潛在原因。 本細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒,以X-Gal為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物。從而在光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。 圖1. 正常細(xì)胞和衰老細(xì)胞用細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒染色后的示例圖片。 本試劑盒僅染色衰老細(xì)胞,不會(huì)染色衰老前的細(xì)胞(presenescent cells)、靜止期細(xì)胞(quiescent cells)、永生細(xì)胞(immortal cells)或腫瘤細(xì)胞。 如果使用6孔板檢測(cè),足夠測(cè)定100個(gè)樣品;使用24孔板測(cè)定,足夠測(cè)定400個(gè)樣品;使用96孔板測(cè)定,足夠測(cè)定1000個(gè)樣品。對(duì)于組織切片或組織塊,可以檢測(cè)的樣品數(shù)量視樣品的大小而定。對(duì)于普通的切片也至少足夠檢測(cè)100個(gè)樣品。 注意事項(xiàng): 1. β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蝕性和毒性,操作時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。 2. 細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色反應(yīng)依賴于特定的pH條件,不能在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行染色反應(yīng)。用于細(xì)胞培養(yǎng)的二氧化碳培養(yǎng)箱中較高濃度的二氧化碳會(huì)影響染色工作液的pH值,而導(dǎo)致染色失敗。 3. 試劑解凍后或使用前如果有沉淀,必須在使用前確保沉淀全部溶解。β-半乳糖苷酶染色液B剛從試劑盒中取出時(shí),管底可能存在少量沉淀,屬正?,F(xiàn)象,充分混勻或Vortex后,沉淀會(huì)全部溶解,并須確保在全部溶解后使用。配制染色工作液時(shí),也可能有少量絮狀沉淀出現(xiàn),震蕩混勻后就會(huì)完全溶解,且須確保全部溶解后才能使用。 4. 配制染色工作液時(shí)需使用聚丙烯(polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯(polystyrene)容器。但染色時(shí)可以在聚苯乙烯(polystyrene)容器中進(jìn)行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。
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