"Onda 11 epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。 N1E-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87MG細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、AML193細(xì)胞 SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞 HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 Onda 11 epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞 Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞 NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞 Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞 TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 Onda 11 epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。 Hs606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞 L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞 AX-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK-1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞 CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞 OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞 J.E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞 MCF12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞 PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞 MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞 R.K.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞 Onda 11 epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 P3JHR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞 SW-1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞 OUMS23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞 LNCaP C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞 NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞 MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1963細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞 MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1963細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞 SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞 YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞 KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞 SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞 NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞 TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞 CA46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞 HS578細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA-1細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞 P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞 KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞 H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞 High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞 HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞 HUT28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 HSR細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞 NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞 RH-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞、H498細(xì)胞 PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞 COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞 Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞 CNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細(xì)胞、SP-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞 HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞 HUSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞 ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞 HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞 SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞 SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞 SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞 SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞 MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞 MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞 A10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞 Walker 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞 SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞 Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞 HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞 Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞 CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞 Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞 U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞 BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞 NCIH1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞 SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞 Onda 11 epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 CCC-HPF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rHSC-99細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞 HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞 IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細(xì)胞、K1735細(xì)胞、GDM1細(xì)胞 AX-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK-1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、IGROV細(xì)胞 "
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