"MDCK-II epithelioid cells犬腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
MDCK-II epithelioid cells犬腎細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，３-４天傳１次
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞
SKNF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞
Dami細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞
KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MDCK-II epithelioid cells犬腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
HEK 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞
746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞
MOLT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞、SNU668細(xì)胞
OS-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細(xì)胞、SF-767細(xì)胞、3T6細(xì)胞
MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞
MDCK-II epithelioid cells犬腎細(xì)胞系
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4B細(xì)胞、KATO III細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞
A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
BGC823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、MLMA細(xì)胞
HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
NCI-H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞
138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9724細(xì)胞、A-204細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞
D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞
PC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細(xì)胞、HOP92細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞
HCT 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞
A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
SKN-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞
H-2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞
MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
IEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞、ME-180細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
SK-MES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞、MB468細(xì)胞
NMCG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVSMC細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞
SK-ChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞
HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
CHP 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
LA-N-6(OAN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
SK RC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞
MDCK-II epithelioid cells犬腎細(xì)胞系
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞
HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRMT-1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞
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