"FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞 RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞 H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞 細胞生長:貼壁 FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:2-3天換液1次 LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞 SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞 RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞 OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞 FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞 Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞 P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞 RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞 NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞 RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞 U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞 Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞 HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞 SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞 FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細胞系 Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞 A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞 U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞 NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞 NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞 KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞 KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞 JCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞 LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞 SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞 HIEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞 HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞 AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞 McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞 D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞 BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞 KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞 SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞 BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞 MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞 HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞 HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞 NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞 NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞 ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞 NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞 CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞 PC 61.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞 H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞 DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞 MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞 NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞 NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞 NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞 PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞 YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞 MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞 CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞 Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞 Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞 Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞 TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞 PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞 Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞 GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞 BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞 MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞 COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞 FDC-P1 epithelioid cells小鼠正常骨髓細胞系 SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞 Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-3細胞、SKM-1細胞、HuT78細胞 AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細胞、639 V細胞、NCI-HUT-292細胞 P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、F442-A細胞、CCFSTTG1細胞 "
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