"COLO 680N epithelioid cells人食管鱗狀癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
COLO 680N epithelioid cells人食管鱗狀癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COLO 680N epithelioid cells人食管鱗狀癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會(huì)對細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
C4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
COLO 680N epithelioid cells人食管鱗狀癌細(xì)胞系
JiyoyeP-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞
10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞
SCC25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-940細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
JeKo-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
NCI-H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細(xì)胞、H22細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞
COLO 680N epithelioid cells人食管鱗狀癌細(xì)胞系
MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-S3細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
HP615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 8.13細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
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