"BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細胞系

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。

OV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞

Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞

MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞

細胞生長：貼壁

BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細胞系

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。

細胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。

4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞

CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞

MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞

M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞

SCL II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細胞系

細胞生長特性：懸浮生長

細胞形態(tài)特性：圓形

造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！

BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞

B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞

NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞

Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞

HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞

CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞

SUNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞

OCUM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞

SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞

BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細胞系

PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞

HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞

MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞

MCA 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞

EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞

Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞

Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞

Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞

AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞

NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞

Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞

NBL-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞

Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞

WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞

DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞

Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞

IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞

Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞

COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞

AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞

UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞

Clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞

H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞

J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞

IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞

Huh 7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞

Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞

H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞

RPMI no 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞

DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞

NCI-SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞

CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞

PANC 203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞

BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞

KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞

IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞

IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞

HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞

Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞

MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞

PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞

RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞

SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞

COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞

Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞

P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞

SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞

Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞

NT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞

BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細胞系

EB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞

Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細胞、G-402細胞、NCI-157細胞

HLEB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1細胞、SNU449細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞

NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細胞、NCI-H1417細胞、Meat Animal Research Center-145細胞

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