"ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
細胞生長：貼壁
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；每周２-３次。
ACC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞
Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
NCIH1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細胞系
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
MDA-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
PCI-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
X63Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞
Co320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞
A549/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞
MT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
SVHUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
WM 239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
RD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
MC 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
Vero E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
HCFB（HCF）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
SK.MEL.28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
NBL_S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
HEC-151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞
SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細胞系
OCILY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
6T-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-449細胞、SLMT1細胞、FHL 124細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、Clone 15 HL-60細胞、CII細胞
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細胞、PLA-802細胞、C41細胞
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