"RT-4 epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞 CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞 Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 RT-4 epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代,每周2-3次。 MM1-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞 RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞 NG-108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CL11細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞 U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞 C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 RT-4 epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:多角 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 P3J HR1-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞 Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞 Rat-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215A細(xì)胞、MDA231細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞 MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞 WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞 Chinese Hamster Ovary細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs934T細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞 H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞 MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞 SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞 BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞 RT-4 epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系 MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞 HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞 HuNS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞、ACHN細(xì)胞 NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞 WEHI-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞 H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8402細(xì)胞、TE-10細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞 H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞 M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞 HS0578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells (TK-)細(xì)胞、TK 10細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞 U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞 IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞 NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞 AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞 A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞 Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞 HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞 G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞 LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞 ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞 KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞 CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞 SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞 MC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞 HCC1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-829細(xì)胞、3T6細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞 PL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 266細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞 EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞 WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞 HEL-92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞 Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞、MLFC細(xì)胞 NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞 ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞 Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞 CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞 SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞 Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞 PE/CA-PJ-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞 COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞 OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞 Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞 HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞 HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞 NMCG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞 CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞 NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG-3細(xì)胞、SW 839細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞 Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞 Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞 Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞 WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞 T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞 Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx-147細(xì)胞、H510A細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞 WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞 RT-4 epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞系 MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞 ES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML5細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞 Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、AGS細(xì)胞 Rat-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215A細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞 "
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