"TGBC11TKB epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 OVCA 420細胞系相關產(chǎn)品:IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞 MDA-415細胞系相關產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 SCC-1395細胞系相關產(chǎn)品:mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞 細胞生長:貼壁 TGBC11TKB epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2傳代 CD-18細胞系相關產(chǎn)品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞 NCI-H774細胞系相關產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞 Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞 SNU449細胞系相關產(chǎn)品:BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞 KFB細胞系相關產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 TGBC11TKB epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 EMT-6細胞系相關產(chǎn)品:CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞 Colon-38細胞系相關產(chǎn)品:CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞 HT144mel細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞 Kit-225細胞系相關產(chǎn)品:PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞 MRC-V細胞系相關產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞 WERIRb1細胞系相關產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細胞、HCC0070細胞、Ly18細胞 RMC細胞系相關產(chǎn)品:NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞 Pa16C細胞系相關產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞 SKml2細胞系相關產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞 SBC3細胞系相關產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞 TGBC11TKB epithelioid cells人胃癌細胞系 HS0578T細胞系相關產(chǎn)品:L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞 HBL100細胞系相關產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞 NCI H716細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞 HOSEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞 NCIH820細胞系相關產(chǎn)品:HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞 B-16細胞系相關產(chǎn)品:SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞 B-16細胞系相關產(chǎn)品:SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞 Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞 OsA-CL細胞系相關產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞 CEM T4細胞系相關產(chǎn)品:DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞 TALL 1細胞系相關產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞 Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關產(chǎn)品:PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞 H-157細胞系相關產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 OV-2008細胞系相關產(chǎn)品:IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞 C918細胞系相關產(chǎn)品:BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞 GM04679細胞系相關產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞 NIH-3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞 WEHI 164細胞系相關產(chǎn)品:HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞 MDAMB175細胞系相關產(chǎn)品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞 MFE-280細胞系相關產(chǎn)品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞 Adeno-293細胞系相關產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞 V-79-4細胞系相關產(chǎn)品:HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞 Murine Lung Epithelial-12細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞 Alexander細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞 Hs 888.T細胞系相關產(chǎn)品:SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞 SLMT1細胞系相關產(chǎn)品:L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞 MDA-MB-435 S細胞系相關產(chǎn)品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞 NCIH208細胞系相關產(chǎn)品:L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞 Cloudman S91 melanoma細胞系相關產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞 GM05372E細胞系相關產(chǎn)品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞 McG-1細胞系相關產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞 PL 45細胞系相關產(chǎn)品:RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞 NCI-H2227細胞系相關產(chǎn)品:H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞 SKMEL-2細胞系相關產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞 H2073細胞系相關產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞 SW-1271細胞系相關產(chǎn)品:HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞 LTEPa2細胞系相關產(chǎn)品:SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞 NCI747細胞系相關產(chǎn)品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞 CA922細胞系相關產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞 L615細胞系相關產(chǎn)品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞 SKNF1細胞系相關產(chǎn)品:HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞 B95.8細胞系相關產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞 EU-4細胞系相關產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞 BV2細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞 H-522細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞 Hs 766細胞系相關產(chǎn)品:SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞 C6661細胞系相關產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞 SKNBE2細胞系相關產(chǎn)品:PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞 Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關產(chǎn)品:U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞 TGBC11TKB epithelioid cells人胃癌細胞系 COLO-699細胞系相關產(chǎn)品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞 BEL-7402細胞系相關產(chǎn)品:5-8F細胞、MS 751細胞、GH3細胞 GDM-1細胞系相關產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、HIEC細胞 HT144-mel細胞系相關產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、SNU16細胞、RPMI No. 1846細胞 "
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